非洲馬瘟血球凝集和血球凝集抑制試驗(yàn)檢測(cè)

非洲馬瘟（African Horse Sickness, AHS）是由非洲馬瘟病毒（AHSV）引起的一種急性、烈性傳染病，主要感染馬科動(dòng)物，通過(guò)吸血昆蟲傳播，具有高致死率。由于其可能對(duì)全球養(yǎng)馬業(yè)和國(guó)際貿(mào)易造成重大威脅，快速、準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法對(duì)疫情監(jiān)測(cè)和防控至關(guān)重要。血球凝集試驗(yàn)（Hemagglutination Test, HA）和血球凝集抑制試驗(yàn)（Hemagglutination Inhibition Test, HI）是檢測(cè)非洲馬瘟病毒及其抗體的經(jīng)典方法，具有操作簡(jiǎn)便、成本低、特異性強(qiáng)等特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于臨床診斷和流行病學(xué)調(diào)查。

檢測(cè)項(xiàng)目

非洲馬瘟的HA和HI試驗(yàn)主要針對(duì)以下兩類目標(biāo)：
1. 病毒抗原檢測(cè)：通過(guò)HA試驗(yàn)檢測(cè)樣本中是否含有非洲馬瘟病毒的血凝活性，初步判斷病毒感染情況。
2. 抗體檢測(cè)：利用HI試驗(yàn)測(cè)定動(dòng)物血清中特異性抗體的效價(jià)，評(píng)估免疫狀態(tài)或感染后的抗體動(dòng)態(tài)變化。

檢測(cè)儀器

實(shí)驗(yàn)需配備以下核心設(shè)備：
- 微量振蕩器：用于均勻混合病毒與紅細(xì)胞懸液。
- 離心機(jī)：用于紅細(xì)胞洗滌和血清處理。
- 酶標(biāo)儀或肉眼判讀系統(tǒng)：用于觀察血球凝集結(jié)果。
- 恒溫培養(yǎng)箱：維持反應(yīng)所需溫度（通常為37℃）。
- 微量移液器及U型/ V型微量反應(yīng)板：用于精確分配試劑和反應(yīng)體系構(gòu)建。

檢測(cè)方法

1. 血球凝集試驗(yàn)（HA）
- 步驟：將系列稀釋的待檢樣本與固定濃度的馬紅細(xì)胞懸液混合，孵育后觀察凝集現(xiàn)象。若紅細(xì)胞在孔底形成均勻薄層（凝集陽(yáng)性），則表明存在病毒抗原。
- 結(jié)果判定：以能引起完全凝集的最高稀釋度作為HA效價(jià)，通常效價(jià)≥1:16判定為陽(yáng)性。

2. 血球凝集抑制試驗(yàn)（HI）
- 步驟：將待檢血清進(jìn)行梯度稀釋后，加入已知HA效價(jià)的病毒抗原，孵育后加入紅細(xì)胞懸液。若血清中含有特異性抗體，則能抑制病毒與紅細(xì)胞的結(jié)合。
- 結(jié)果判定：以完全抑制凝集的血清最高稀釋度作為HI抗體效價(jià)，效價(jià)≥1:40具有診斷意義。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

該檢測(cè)需遵循國(guó)際和國(guó)內(nèi)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，包括：
- OIE《陸生動(dòng)物診斷試驗(yàn)手冊(cè)》：規(guī)定HA/HI試驗(yàn)的操作流程和質(zhì)量控制要求。
- GB/T 22915-2008《非洲馬瘟診斷技術(shù)》：中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中詳細(xì)描述了試劑制備、試驗(yàn)步驟及結(jié)果解釋。
- 生物安全規(guī)范：實(shí)驗(yàn)需在BSL-2及以上實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，病毒滅活處理符合WHO標(biāo)準(zhǔn)。

注意事項(xiàng)：需設(shè)置陽(yáng)性/陰性對(duì)照以排除非特異性凝集，且紅細(xì)胞種類（通常選用馬或豚鼠紅細(xì)胞）、pH值（7.2-7.4）和孵育時(shí)間（1-2小時(shí)）需嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化，以確保結(jié)果可靠性。

檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)證書

CMA認(rèn)證

檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書

證書編號(hào)：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS認(rèn)可

實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可證書

證書編號(hào)：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO認(rèn)證

質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書

證書編號(hào)：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日

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