馬病毒性動脈炎（馬病毒性動脈炎病毒感染）概述
馬病毒性動脈炎（Equine Viral Arteritis, EVA）是由馬動脈炎病毒（EAV）引起的一種高度傳染性馬屬動物疾病，主要影響馬的呼吸系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)及血管內(nèi)皮細(xì)胞。該病毒可通過呼吸道分泌物、精液或胎盤垂直傳播，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、流產(chǎn)（尤其是妊娠母馬）、呼吸道癥狀及幼駒死亡等。由于其潛在的經(jīng)濟損失和國際動物貿(mào)易中的檢疫重要性，及時準(zhǔn)確的檢測對疫情控制、種馬場管理及進出口檢疫至關(guān)重要。
EVA的檢測需結(jié)合臨床癥狀、流行病學(xué)調(diào)查及實驗室診斷，其中實驗室檢測是確認(rèn)感染的核心手段。全球多個國家和國際組織（如OIE）已制定了嚴(yán)格的檢測標(biāo)準(zhǔn)，以確保結(jié)果的可靠性和可比性。檢測內(nèi)容涵蓋病毒分離、抗原檢測、抗體篩查及分子生物學(xué)分析等多個維度，需根據(jù)檢測目的（如診斷、監(jiān)測或凈化）選擇合適方法。
檢測項目
馬病毒性動脈炎的實驗室檢測主要包括以下項目：
1. 病毒分離與培養(yǎng)：通過采集鼻拭子、精液、流產(chǎn)胎兒組織或血液樣本，接種于Vero細(xì)胞、RK-13細(xì)胞等敏感細(xì)胞系進行病毒增殖，結(jié)合細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）觀察，確認(rèn)病毒存在。
2. 血清學(xué)檢測：包括病毒中和試驗（VNT）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）等，用于檢測血清中特異性IgG和IgM抗體，判斷馬匹是否感染或曾暴露于病毒。
3. 分子生物學(xué)檢測：采用RT-PCR或?qū)崟r熒光定量PCR技術(shù)，針對病毒基因組（如ORF5、ORF7等保守區(qū)域）進行核酸擴增，適用于早期感染診斷和精液篩查。
4. 抗原檢測：利用免疫熒光（IFA）或免疫組化（IHC）技術(shù)，直接在組織樣本中定位病毒抗原。
檢測儀器
檢測過程中需依賴多種精密儀器：
? PCR儀：用于核酸擴增，如ABI 7500實時熒光定量PCR系統(tǒng)。
? 酶標(biāo)儀：配合ELISA試劑盒讀取吸光度值，如BioTek Synergy H1多功能微孔板檢測儀。
? 細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備：包括CO?培養(yǎng)箱、生物安全柜及倒置顯微鏡，用于病毒分離與細(xì)胞病變觀察。
? 電泳系統(tǒng)：驗證PCR產(chǎn)物大小，如Bio-Rad凝膠成像系統(tǒng)。
檢測方法
1. 分子生物學(xué)方法：
實時熒光定量RT-PCR為目前最常用的快速檢測技術(shù)，可在感染后3-5天檢出病毒RNA，靈敏度達102拷貝/μL。引物設(shè)計通常針對EAV的N蛋白基因（ORF7）或囊膜蛋白基因（ORF5）。
2. 血清學(xué)方法：
病毒中和試驗（VNT）是國際認(rèn)可的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但耗時較長（需5-7天）；ELISA法則更適用于大規(guī)模篩查，商業(yè)試劑盒（如ID Screen? EVA IgM/IgG）可區(qū)分急慢性感染。
3. 病毒分離：
雖特異性高，但操作復(fù)雜且周期長（需3-10天），多用于毒株分型或研究。
檢測標(biāo)準(zhǔn)
國際與國內(nèi)主要遵循以下標(biāo)準(zhǔn)：
? OIE《陸生動物診斷試驗與疫苗手冊》：規(guī)定VNT、PCR和病毒分離為官方推薦方法，精液出口需符合病毒核酸檢測陰性要求。
? GB/T 22915-2008（中國）：明確EVA的病毒分離、RT-PCR及血清學(xué)檢測的操作規(guī)程。
? USDA-APHIS標(biāo)準(zhǔn)：要求種馬定期進行血清學(xué)監(jiān)測，精液供體馬需連續(xù)兩次PCR檢測陰性。
檢測過程中需嚴(yán)格遵循生物安全三級（BSL-3）標(biāo)準(zhǔn)，防止實驗室污染及病毒擴散。陽性結(jié)果需經(jīng)不同方法復(fù)核，并結(jié)合臨床表現(xiàn)綜合判定。
CMA認(rèn)證
檢驗檢測機構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書
證書編號：241520345370
有效期至：2030年4月15日
CNAS認(rèn)可
實驗室認(rèn)可證書
證書編號：CNAS L22006
有效期至：2030年12月1日
ISO認(rèn)證
質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書
證書編號：ISO9001-2024001
有效期至：2027年12月31日
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