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對(duì)蝦白斑病檢疫檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-25 08:49:03 更新時(shí)間：2025-07-24 22:15:36

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

對(duì)蝦白斑病檢疫檢測(cè)的重要性

對(duì)蝦白斑?。╓hite Spot Syndrome, WSS）是由白斑綜合征病毒（WSSV）引起的一種高致病性、高致死率的傳染性疾病，主要感染養(yǎng)殖對(duì)蝦、蟹類等甲殼類動(dòng)物。該病傳播速度快，感染后死亡率可高達(dá)80%-100%，對(duì)全球水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。因此，開展對(duì)蝦白斑病的檢疫檢測(cè)成為保障養(yǎng)殖安全、阻斷疫情擴(kuò)散的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。通過(guò)科學(xué)、精準(zhǔn)的檢測(cè)手段，能夠早期發(fā)現(xiàn)病原、及時(shí)隔離感染個(gè)體，為防控措施的制定提供依據(jù)，同時(shí)助力國(guó)際貿(mào)易中病害風(fēng)險(xiǎn)管控。

檢測(cè)項(xiàng)目與核心內(nèi)容

對(duì)蝦白斑病檢疫檢測(cè)主要包括以下項(xiàng)目：
1. 臨床癥狀觀察：檢測(cè)對(duì)蝦體表是否出現(xiàn)直徑0.5-2.0 mm的白色斑點(diǎn)，甲殼易剝離或出現(xiàn)發(fā)紅現(xiàn)象；
2. 病原體檢測(cè)：通過(guò)分子生物學(xué)或免疫學(xué)方法直接檢測(cè)WSSV的存在；
3. 組織病理學(xué)分析：觀察鰓、胃、肝胰腺等組織的細(xì)胞核病變特征；
4. 環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估：檢測(cè)養(yǎng)殖水體、餌料等潛在傳播媒介的病毒攜帶情況。

常用檢測(cè)儀器與設(shè)備

針對(duì)不同檢測(cè)方法，需配備以下關(guān)鍵儀器：
- PCR儀：用于病毒DNA的擴(kuò)增與檢測(cè)；
- 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀：實(shí)現(xiàn)病毒載量的精確定量；
- 電子顯微鏡：觀察病毒粒子形態(tài)（桿狀，直徑70-150 nm）；
- 酶標(biāo)儀：配合ELISA試劑盒進(jìn)行抗體檢測(cè)；
- 核酸提取儀：快速提取樣本中的病毒核酸；
- 組織切片機(jī)：用于病理學(xué)樣本制備。

主要檢測(cè)方法及流程

1. 分子生物學(xué)檢測(cè)法：
- 巢式PCR法：采用WSSV特異性引物（如VP28基因靶點(diǎn)），通過(guò)兩輪擴(kuò)增提高靈敏度；
- 實(shí)時(shí)熒光定量PCR：可檢測(cè)低至10拷貝/μL的病毒DNA，實(shí)現(xiàn)定量分析；
- LAMP法：無(wú)需復(fù)雜設(shè)備，適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。
2. 免疫學(xué)檢測(cè)法：
- 單克隆抗體ELISA：檢測(cè)病毒抗原，靈敏度達(dá)1 ng/mL；
- 免疫層析試紙條：15分鐘內(nèi)完成現(xiàn)場(chǎng)初篩。
3. 病理學(xué)檢測(cè)法：
- 石蠟切片H&E染色：觀察細(xì)胞核腫大、嗜堿性包涵體等特征病變；
- 電鏡觀察：直接確認(rèn)病毒粒子形態(tài)。

國(guó)際與國(guó)內(nèi)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

1. 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)：
- OIE《水生動(dòng)物疾病診斷手冊(cè)》第11章（2023版）規(guī)定的WSSV檢測(cè)規(guī)程；
- ISO/TS 15216-2:2019 水產(chǎn)病原分子檢測(cè)通用要求。
2. 國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)：
- GB/T 15805.5-2018《對(duì)蝦白斑綜合征病毒檢測(cè)規(guī)程》；
- SN/T 1152-2020《進(jìn)出口水生動(dòng)物WSSV檢疫技術(shù)規(guī)范》；
- NY/T 2970-2016《對(duì)蝦疫病監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范》。

檢測(cè)結(jié)果判定與報(bào)告

依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)要求，檢測(cè)結(jié)果需滿足：
- PCR檢測(cè)：陽(yáng)性樣本需在預(yù)期位置出現(xiàn)特異性條帶（如144 bp、941 bp）；
- 實(shí)時(shí)PCR：Ct值≤35且擴(kuò)增曲線呈典型S型；
- ELISA：樣本OD值與陰性對(duì)照比值（P/N）≥2.1判為陽(yáng)性。
最終報(bào)告需包含檢測(cè)方法、儀器型號(hào)、標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)及結(jié)論，由授權(quán)簽字人審核簽發(fā)。