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馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-05-14 00:29:20 更新時(shí)間：2025-05-13 00:29:21

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢測(cè)的重要性

馬鈴薯紡錘塊莖類病毒（Potato Spindle Tuber Viroid, PSTVd）是一種嚴(yán)重危害馬鈴薯產(chǎn)業(yè)的病原體，可導(dǎo)致植株矮化、塊莖變形、產(chǎn)量驟降甚至絕收。該病毒通過種薯、機(jī)械接觸或昆蟲媒介傳播，具有極強(qiáng)的傳染性和潛伏性。由于其RNA結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單且不編碼蛋白質(zhì)，傳統(tǒng)病毒檢測(cè)方法難以有效識(shí)別，因此需要采用高靈敏度和特異性的檢測(cè)技術(shù)。及時(shí)、準(zhǔn)確的檢測(cè)對(duì)種薯質(zhì)量監(jiān)管、病害防控及國(guó)際貿(mào)易中的檢疫要求至關(guān)重要。

檢測(cè)項(xiàng)目與對(duì)象

PSTVd的檢測(cè)主要針對(duì)以下對(duì)象： 1. 馬鈴薯植株：葉片、莖稈及根系中的病毒含量； 2. 種薯與塊莖：潛伏感染的種質(zhì)材料； 3. 土壤與器械：病毒殘留的間接檢測(cè)； 4. 種子與繁殖材料：國(guó)際貿(mào)易中的檢疫項(xiàng)目。此外，需結(jié)合馬鈴薯生長(zhǎng)期進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，重點(diǎn)關(guān)注苗期、塊莖形成期及收獲期的病毒活性。

常用檢測(cè)儀器

針對(duì)PSTVd的檢測(cè)，需依賴以下核心儀器： 1. RT-PCR儀：用于逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，擴(kuò)增病毒RNA片段； 2. 電泳系統(tǒng)：分析PCR產(chǎn)物或核酸雜交結(jié)果； 3. 核酸提取儀：高效提取植物組織中的RNA； 4. 熒光定量PCR儀：實(shí)現(xiàn)病毒定量檢測(cè)； 5. 核酸雜交儀：用于斑點(diǎn)雜交或Northern雜交技術(shù)。部分實(shí)驗(yàn)室還會(huì)使用高通量測(cè)序儀（NGS）進(jìn)行全基因組分析，以追蹤病毒變異。

主要檢測(cè)方法

目前主流的檢測(cè)技術(shù)包括三大類： 1. 分子生物學(xué)方法： - RT-PCR：通過逆轉(zhuǎn)錄將病毒RNA轉(zhuǎn)為cDNA后擴(kuò)增，靈敏度高； - 熒光定量RT-PCR（qRT-PCR）：兼具定性和定量功能，適用于大規(guī)模篩查； - 核酸雜交：使用特異性探針檢測(cè)病毒RNA，適合田間快速檢測(cè)。 2. 生物測(cè)定法：將疑似樣本接種到指示植物（如番茄）上，觀察癥狀，但耗時(shí)長(zhǎng)。 3. 等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（如LAMP）：無需復(fù)雜設(shè)備，適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)與規(guī)范

國(guó)內(nèi)外針對(duì)PSTVd檢測(cè)制定了多項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)： 1. 中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB/T 35337-2017）：規(guī)定RT-PCR和核酸雜交的檢測(cè)流程； 2. 國(guó)際植物保護(hù)公約（IPPC）標(biāo)準(zhǔn)：要求出口種薯必須通過qRT-PCR認(rèn)證； 3. 歐洲與地中海植物保護(hù)組織（EPPO）標(biāo)準(zhǔn)：明確采樣方法和陽性判定閾值； 4. ISO 16140認(rèn)證方法：驗(yàn)證檢測(cè)技術(shù)的靈敏度和特異性。檢測(cè)報(bào)告需包含樣本信息、檢測(cè)方法、結(jié)果判定及實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制數(shù)據(jù)，確保結(jié)果可追溯。

通過上述標(biāo)準(zhǔn)化流程，馬鈴薯紡錘塊莖類病毒的檢測(cè)可有效阻斷病毒傳播，保障種薯安全和產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展。