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非洲木薯花葉病毒（類）檢測

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發(fā)布時間：2025-05-14 01:07:41 更新時間：2025-05-13 01:07:43

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

非洲木薯花葉病毒（類）檢測的重要性

非洲木薯花葉病毒（African cassava mosaic virus, ACMV）及其相關(guān)病毒類是危害木薯作物的主要病原體之一，屬于雙生病毒科（Geminiviridae）的菜豆金色花葉病毒屬（Begomovirus）。該病毒通過煙粉虱（Bemisia tabaci）傳播或帶毒種苗擴(kuò)散，導(dǎo)致木薯葉片出現(xiàn)黃化、卷曲、花葉等癥狀，嚴(yán)重時可造成植株矮化甚至絕收，對非洲、亞洲及拉丁美洲的木薯產(chǎn)業(yè)構(gòu)成重大威脅。由于木薯是全球近8億人口的主糧作物，及時、準(zhǔn)確的病毒檢測對保障糧食安全、控制病害傳播及選育抗病品種具有重要意義。

檢測項目

針對非洲木薯花葉病毒（類）的檢測主要涵蓋以下項目：
1. 病原檢測：通過分子生物學(xué)或免疫學(xué)方法直接檢測病毒核酸或蛋白。
2. 傳播媒介檢測：分析煙粉虱攜帶病毒的頻率及病毒株系。
3. 種苗檢疫：確保無病毒種苗用于種植，阻斷垂直傳播途徑。
4. 抗病品種篩選：評估木薯品種對病毒的耐受性或抗性。

檢測儀器

常用檢測儀器包括：
- PCR儀：用于病毒DNA的擴(kuò)增與定性分析。
- 凝膠電泳系統(tǒng)：檢測PCR產(chǎn)物大小以確認(rèn)病毒存在。
- 熒光定量PCR儀（qPCR）：定量分析病毒載量。
- 酶聯(lián)免疫吸附測定儀（ELISA）：通過抗體檢測病毒外殼蛋白。
- 電子顯微鏡：觀察病毒顆粒形態(tài)（雙生病毒特征的雙聯(lián)體結(jié)構(gòu)）。
- 高通量測序平臺：用于病毒基因組測序及變異分析。

檢測方法

主要檢測技術(shù)包括：
1. PCR檢測法：設(shè)計特異性引物（如ACMV CP基因引物），通過DNA提取、擴(kuò)增及電泳分析確認(rèn)病毒。
2. 環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增（LAMP）：無需復(fù)雜設(shè)備，適用于田間快速篩查。
3. ELISA檢測：利用單克隆抗體捕獲病毒抗原，適合大規(guī)模樣本初篩。
4. 分子雜交技術(shù)：采用標(biāo)記探針與病毒DNA結(jié)合，靈敏度高。
5. 血清學(xué)試紙條：基于膠體金免疫層析技術(shù)，實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場即時檢測。

檢測標(biāo)準(zhǔn)

國際與國內(nèi)主要依據(jù)以下標(biāo)準(zhǔn)：
- 國際標(biāo)準(zhǔn)：FAO《木薯病害診斷規(guī)程》、OIE《植物病毒檢測指南》。
- ISO 16140系列：驗證分子與免疫學(xué)檢測方法的有效性。
- 中國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 28067：針對雙生病毒的核酸檢測技術(shù)要求。
- 非洲區(qū)域標(biāo)準(zhǔn)（IITA）：規(guī)定木薯種苗病毒檢測閾值與處理流程。

結(jié)論

非洲木薯花葉病毒（類）檢測需結(jié)合分子生物學(xué)、免疫學(xué)及田間監(jiān)測技術(shù)，通過標(biāo)準(zhǔn)化流程確保結(jié)果準(zhǔn)確性。隨著CRISPR-Cas等新型檢測技術(shù)的發(fā)展，未來將進(jìn)一步提升檢測靈敏度與效率，為全球木薯產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供技術(shù)保障。