馬病毒性動脈炎檢疫檢測概述
馬病毒性動脈炎（Equine Viral Arteritis, EVA）是由馬動脈炎病毒（EAV）引起的一種高度傳染性傳染病，主要影響馬屬動物，尤其是種馬和繁殖母馬。該病毒可通過呼吸道、生殖道傳播，導致發(fā)熱、流產(chǎn)、幼駒死亡及呼吸道癥狀，對養(yǎng)馬業(yè)造成重大經(jīng)濟損失。由于EVA具有隱性感染和持續(xù)性帶毒的特點，檢疫檢測成為防控該病的關鍵環(huán)節(jié)。國際動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為須申報疾病，各國均制定了嚴格的檢疫規(guī)范。通過科學的檢測手段，早期發(fā)現(xiàn)感染個體，能夠有效阻斷病毒傳播，保障馬群健康及國際貿(mào)易安全。
檢測項目
EVA檢疫檢測主要包括以下核心項目：
1. 病毒分離與鑒定：通過采集鼻拭子、血液或精液樣本，接種敏感細胞系（如RK-13細胞）進行病毒增殖，結(jié)合免疫熒光或電鏡觀察確認病毒存在。
2. 血清學檢測：檢測特異性抗體，常用方法包括病毒中和試驗（VNT）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA），適用于感染后抗體篩查和免疫狀態(tài)評估。
3. 核酸檢測：采用RT-PCR或?qū)崟r熒光定量PCR技術檢測病毒RNA，靈敏度高且適用于早期診斷。
4. 病理學檢查：對流產(chǎn)胎兒或死亡病例進行組織病理學分析，觀察動脈炎特征性病變。
檢測儀器
EVA檢測需依賴專業(yè)儀器設備：
- PCR儀：用于病毒核酸擴增及定量分析（如ABI 7500實時熒光定量PCR系統(tǒng)）；
- 酶標儀：配合ELISA試劑盒讀取吸光度值（如Thermo Fisher Multiskan GO）；
- 細胞培養(yǎng)系統(tǒng)：包括生物安全柜、CO?培養(yǎng)箱等，用于病毒分離；
- 熒光顯微鏡：用于免疫熒光標記的病毒抗原觀察；
- 超低溫冰箱：-80℃保存樣本及試劑。
檢測方法
主要檢測方法分為三類：
1. 病原學檢測：
- 病毒分離：樣本處理后接種細胞，觀察細胞病變效應（CPE），通過免疫熒光或電鏡確認。
- RT-PCR：設計特異性引物（如針對EAV ORF5基因），提取RNA后進行反轉(zhuǎn)錄和擴增。
2. 血清學檢測：
- ELISA：使用重組N蛋白包被板，檢測IgG或IgM抗體，1-3小時出結(jié)果；
- 病毒中和試驗（VNT）：將血清與病毒混合后接種細胞，通過CPE抑制判斷抗體效價。
3. 分子生物學技術：
- 實時熒光定量PCR：可定量病毒載量，檢測限低至10拷貝/μL；
- 基因測序：用于病毒分型及溯源分析。
檢測標準
全球主要遵循以下標準：
- OIE標準：《陸生動物診斷試驗手冊》規(guī)定病毒分離、VNT和ELISA為官方認可方法；
- 中國國家標準：GB/T 22915-2008《馬病毒性動脈炎診斷技術》明確檢測流程及判定標準；
- 歐盟指令：2009/156/EC要求進出口馬匹需提供ELISA或PCR陰性證明；
- 種馬檢疫規(guī)范：精液捐贈馬需連續(xù)兩次間隔21天PCR檢測陰性，并配合血清學監(jiān)測。
當前，實驗室常采用“核酸檢測+血清學聯(lián)檢”策略提高準確性。檢測結(jié)果需結(jié)合臨床病史綜合判斷，陽性樣本需經(jīng)國家參考實驗室復核。定期參加OIE能力驗證項目（如ISRRT）是保證檢測質(zhì)量的重要措施。
CMA認證
檢驗檢測機構資質(zhì)認定證書
證書編號：241520345370
有效期至：2030年4月15日
CNAS認可
實驗室認可證書
證書編號：CNAS L22006
有效期至：2030年12月1日
ISO認證
質(zhì)量管理體系認證證書
證書編號：ISO9001-2024001
有效期至：2027年12月31日
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