藍(lán)舌病EMAI阻斷ELISA抗體檢測檢測
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發(fā)布時(shí)間:2025-07-25 08:49:03 更新時(shí)間:2025-07-24 22:15:34
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作者:中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心
藍(lán)舌病(Bluetongue Disease, BT)是由藍(lán)舌病病毒(BTV)引起的一種以庫蠓為傳播媒介的反芻動(dòng)物傳染病,主要感染綿羊、牛、山羊等家畜,具有高傳播性和致死性。為有效防控疫情,抗體檢測成為疾" />
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發(fā)布時(shí)間:2025-07-25 08:49:03 更新時(shí)間:2025-07-24 22:15:34
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作者:中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心
藍(lán)舌病(Bluetongue Disease, BT)是由藍(lán)舌病病毒(BTV)引起的一種以庫蠓為傳播媒介的反芻動(dòng)物傳染病,主要感染綿羊、牛、山羊等家畜,具有高傳播性和致死性。為有效防控疫情,抗體檢測成為疾病監(jiān)測和免疫評估的重要環(huán)節(jié)。其中,EMAI阻斷ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)抗體檢測技術(shù)因其特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡便等特點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于藍(lán)舌病病毒抗體的篩查與定量分析。該技術(shù)通過檢測動(dòng)物血清中針對BTV的特異性抗體,可評估動(dòng)物免疫狀態(tài)或感染史,為疫區(qū)防控策略提供科學(xué)依據(jù)。
藍(lán)舌病EMAI阻斷ELISA抗體檢測的核心目標(biāo)是檢測動(dòng)物血清中針對藍(lán)舌病病毒VP7蛋白的特異性IgG抗體。該項(xiàng)目適用于以下場景: 1. 疫區(qū)動(dòng)物群體的抗體水平監(jiān)測; 2. 疫苗接種后的免疫效果評估; 3. 進(jìn)出口動(dòng)物檢疫中的藍(lán)舌病篩查; 4. 疫情暴發(fā)時(shí)的快速診斷與溯源分析。
檢測過程中需使用以下關(guān)鍵儀器設(shè)備: 1. 酶標(biāo)儀:用于讀取ELISA板孔的光密度(OD值),需配備450nm和630nm雙波長濾光片; 2. 洗板機(jī):實(shí)現(xiàn)ELISA板的自動(dòng)化清洗,確保反應(yīng)一致性; 3. 微量移液器(單道/多道):精確加樣,量程范圍覆蓋1-1000μL; 4. 恒溫培養(yǎng)箱:維持37℃恒溫環(huán)境,確保抗原-抗體反應(yīng)充分; 5. 振蕩器:用于樣本與試劑的均勻混合。
EMAI阻斷ELISA檢測基于競爭性免疫反應(yīng)原理,具體步驟如下: 1. 抗原包被:將BTV VP7重組抗原固定于ELISA板孔中; 2. 樣本孵育:加入待檢血清與辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的單克隆抗體混合液,若樣本含抗VP7抗體,則會(huì)與酶標(biāo)抗體競爭結(jié)合抗原; 3. 洗滌與顯色:洗去未結(jié)合物質(zhì)后,加入TMB顯色底物,抗體阻斷效應(yīng)越強(qiáng),顯色越弱; 4. 終止與讀數(shù):加入終止液后,通過酶標(biāo)儀測定OD值,計(jì)算阻斷率(PI值)判斷結(jié)果。
本檢測遵循國際及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),主要包括: 1. OIE《陸生動(dòng)物診斷試驗(yàn)和疫苗手冊》對藍(lán)舌病診斷的技術(shù)要求; 2. ISO/IEC 17025實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系規(guī)范; 3. 結(jié)果判定閾值:當(dāng)樣本PI值≥40%時(shí)判為陽性,30%-40%為可疑(需復(fù)檢),<30%為陰性; 4. 質(zhì)控要求:每批次檢測需包含陽性對照、陰性對照及空白對照,OD值需符合預(yù)設(shè)范圍。
通過上述標(biāo)準(zhǔn)化流程,EMAI阻斷ELISA技術(shù)可實(shí)現(xiàn)對藍(lán)舌病抗體的高效、準(zhǔn)確檢測,為動(dòng)物疫病防控提供可靠的技術(shù)支持。
證書編號:241520345370
證書編號:CNAS L22006
證書編號:ISO9001-2024001
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