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日本乙型腦炎酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測檢測

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-25 08:49:03 更新時(shí)間：2025-07-24 22:15:34

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

日本乙型腦炎酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測概述

日本乙型腦炎（Japanese Encephalitis, JE）是由日本乙型腦炎病毒（JEV）引起的一種經(jīng)蚊媒傳播的人畜共患傳染病，主要流行于亞洲和西太平洋地區(qū)。該病可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染，重癥患者死亡率高且常遺留神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，對人類健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。早期、準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室診斷對臨床治療和疫情控制至關(guān)重要。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）因其高靈敏度、特異性和可操作性，成為JEV血清學(xué)檢測的常用方法，廣泛應(yīng)用于抗體檢測、疫苗免疫效果評估及流行病學(xué)調(diào)查。

檢測項(xiàng)目

日本乙型腦炎ELISA檢測主要包括以下項(xiàng)目：
1. JEV特異性IgM抗體檢測：用于早期診斷，IgM抗體在感染后3-7天出現(xiàn)，持續(xù)1-3個(gè)月；
2. JEV特異性IgG抗體檢測：用于回顧性診斷或免疫效果評價(jià)，IgG抗體在感染后期及恢復(fù)期明顯升高；
3. 抗原檢測：特定實(shí)驗(yàn)條件下可檢測腦脊液或血液中的病毒抗原。

檢測儀器

ELISA檢測需配備以下核心儀器：
- 酶標(biāo)儀（微孔板讀數(shù)儀）：用于測量反應(yīng)后的吸光度值；
- 洗板機(jī)：實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化洗板操作；
- 恒溫孵育箱：控制反應(yīng)溫度（通常37℃±1℃）；
- 微量移液器及多通道移液器：用于精準(zhǔn)加樣；
- 震蕩混勻器：確保試劑均勻混合。

檢測方法

ELISA檢測采用雙抗原夾心法或間接法流程：
1. 樣本處理：采集血清/腦脊液樣本，離心去除雜質(zhì)；
2. 包被抗原：將JEV特異性抗原固定于微孔板；
3. 加樣孵育：加入待檢樣本和酶標(biāo)二抗，37℃孵育；
4. 顯色反應(yīng)：加入底物（如TMB）催化顯色；
5. 終止讀數(shù)：加終止液后通過酶標(biāo)儀測定OD值；
6. 結(jié)果判讀：計(jì)算臨界值（Cut-off值），判定陰陽性。

檢測標(biāo)準(zhǔn)

本檢測需遵循以下標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范：
- GB/T 18638-2020《日本乙型腦炎診斷技術(shù)》中國國家標(biāo)準(zhǔn)；
- WS/T 560-2017《日本腦炎診斷》衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)；
- WHO《Laboratory Manual for Japanese Encephalitis Surveillance》；
- 試劑說明書要求：不同品牌試劑盒需按推薦參數(shù)優(yōu)化反應(yīng)條件；
- 實(shí)驗(yàn)室需通過ISO 15189或GLP認(rèn)證，確保檢測質(zhì)量。