傳染性鮭貧血病分子生物學檢測檢測
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發(fā)布時間:2025-05-14 06:40:05 更新時間:2025-05-13 06:40:06
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作者:中科光析科學技術研究所檢測中心
傳染性鮭貧血?。↖nfectious Salmon Anemia, ISA)是一種由傳染性鮭魚貧血病毒(ISAV)引起的嚴重魚類疾病,主要影響大西洋鮭等經濟性魚類,具有高致死率和傳播速度快的特點。該病在全球范" />
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發(fā)布時間:2025-05-14 06:40:05 更新時間:2025-05-13 06:40:06
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作者:中科光析科學技術研究所檢測中心
傳染性鮭貧血?。↖nfectious Salmon Anemia, ISA)是一種由傳染性鮭魚貧血病毒(ISAV)引起的嚴重魚類疾病,主要影響大西洋鮭等經濟性魚類,具有高致死率和傳播速度快的特點。該病在全球范圍內對水產養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經濟損失,因此快速、準確的分子生物學檢測技術成為防控的關鍵。通過分子檢測手段,能夠早期識別病毒攜帶者,阻斷傳播鏈,同時為疫區(qū)管理和疫苗研發(fā)提供科學依據。
傳染性鮭貧血病的分子生物學檢測主要針對以下項目:
1. 病毒核酸檢測:通過擴增ISAV的特異性基因片段(如HA和F基因),確認病毒存在。
2. 病毒抗原檢測:利用免疫學方法(如ELISA)檢測病毒蛋白,適用于早期感染階段。
3. 病毒抗體檢測:評估魚類感染后的免疫應答,輔助判斷群體感染狀態(tài)。
4. 病毒分型與變異分析:通過測序技術研究病毒基因型,追蹤流行病學來源。
分子生物學檢測需依賴精密儀器完成,主要包括:
- PCR儀:用于核酸擴增,常規(guī)PCR及實時熒光定量PCR(qPCR)。
- 核酸提取儀:自動化提取樣本中的病毒RNA/DNA。
- 電泳系統:驗證PCR產物大小和純度。
- 實時熒光定量PCR儀:定量分析病毒載量,靈敏度高。
- 測序儀:用于病毒基因序列分析和分型。
目前常用的分子生物學檢測方法包括:
1. RT-PCR技術:針對ISAV的RNA基因組,通過逆轉錄生成cDNA后進行擴增,適用于組織、血液樣本檢測。
2. 實時熒光定量PCR(qRT-PCR):結合熒光探針,實現病毒核酸的定量檢測,靈敏度可達10^2拷貝/μL。
3. 巢式PCR:通過兩輪擴增提高檢測特異性,適用于低載量樣本。
4. 基因測序技術:對擴增產物進行測序,比對已知ISAV序列以確認病毒亞型。
5. 環(huán)介導等溫擴增(LAMP):無需復雜設備,可在野外快速檢測,適合現場篩查。
國際與國內針對ISA的分子生物學檢測制定了嚴格標準:
- OIE標準:世界動物衛(wèi)生組織發(fā)布的《水生動物疾病診斷手冊》明確ISAV檢測流程及陽性判定閾值。
- ISO 16140系列:驗證分子檢測方法的特異性、靈敏度和重復性。
- 國家標準:如中國《GB/T 36193-2018 魚類病毒性疾病檢測規(guī)范》,規(guī)定樣品采集、保存及檢測技術要求。
- 實驗室質控要求:包括陰性/陽性對照設置、交叉污染防控及數據解讀規(guī)范。
通過以上檢測項目、儀器和方法的綜合應用,結合國際國內標準,可實現對傳染性鮭貧血病的高效、精準診斷,為水產養(yǎng)殖業(yè)的生物安全管理和疫情控制提供技術保障。
證書編號:241520345370
證書編號:CNAS L22006
證書編號:ISO9001-2024001
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