EPSPS基因檢測
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發(fā)布時間:2025-05-15 19:38:38 更新時間:2025-05-14 19:38:39
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作者:中科光析科學技術研究所檢測中心
EPSPS(5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶)基因是植物中參與芳香族氨基酸生物合成的關鍵基因,其編碼的酶在草甘膦類除草劑的抗性機制中起重要作用。隨著轉基因作物(如抗草甘膦大豆、玉米等" />
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發(fā)布時間:2025-05-15 19:38:38 更新時間:2025-05-14 19:38:39
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作者:中科光析科學技術研究所檢測中心
EPSPS(5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶)基因是植物中參與芳香族氨基酸生物合成的關鍵基因,其編碼的酶在草甘膦類除草劑的抗性機制中起重要作用。隨著轉基因作物(如抗草甘膦大豆、玉米等)的廣泛種植,EPSPS基因檢測成為農業(yè)生物技術、食品安全監(jiān)管及環(huán)境監(jiān)測的核心環(huán)節(jié)。通過檢測EPSPS基因,可以評估作物是否具有抗除草劑特性、確認轉基因成分是否存在,以及監(jiān)測野生植物中可能因基因漂移產生的抗性突變。這一檢測對保障生物安全、規(guī)范轉基因產品流通及推動精準農業(yè)具有重要意義。
EPSPS基因檢測的主要項目包括: 1. 基因存在性檢測:通過定性分析確定樣本中是否含有EPSPS基因或其轉基因版本(如CP4-EPSPS)。 2. 拷貝數(shù)定量:測定EPSPS基因在基因組中的拷貝數(shù),評估轉基因作物的遺傳穩(wěn)定性。 3. 表達水平分析:檢測EPSPS基因的mRNA或蛋白表達量,驗證其功能活性。 4. 突變位點鑒定:針對天然或人工誘變的EPSPS基因,識別關鍵位點變異(如Pro106Ser突變),判斷抗性類型。 5. 物種特異性檢測:區(qū)分不同來源的EPSPS基因(如植物內源基因與外源轉基因)。
EPSPS基因檢測需依賴以下核心儀器: - PCR擴增儀:用于基因片段的特異性擴增,常規(guī)檢測的基礎設備。 - 實時熒光定量PCR儀(qPCR):實現(xiàn)基因拷貝數(shù)的精確定量及高靈敏度檢測。 - 電泳系統(tǒng):通過凝膠電泳驗證PCR產物大小及純度。 - 基因測序儀:用于突變位點的精確鑒定及基因序列比對(如Sanger測序或高通量測序平臺)。 - 生物信息學分析軟件:處理測序數(shù)據并生成可視化報告(如Sequence Scanner、CLC Genomics Workbench)。
EPSPS基因檢測通常采用以下方法: 1. PCR技術:設計特異性引物擴增目標基因片段,結合電泳或探針雜交驗證結果。 2. 實時熒光定量PCR(TaqMan探針法):通過熒光信號動態(tài)監(jiān)測擴增過程,實現(xiàn)快速定量分析。 3. 數(shù)字PCR(dPCR):無需標準曲線的絕對定量方法,適用于低濃度樣本或復雜基質檢測。 4. 基因芯片技術:高通量檢測多個EPSPS基因變異或不同物種來源。 5. 全基因組測序(WGS):全面解析EPSPS基因及其側翼序列,適用于未知轉基因事件的鑒定。
EPSPS基因檢測需嚴格遵循國內外標準: - 國際標準:ISO 21569(轉基因產品檢測方法)、ISO 24276(核酸提取與純化指南)。 - 中國標準:GB/T 19495系列(轉基因產品檢測國家標準)、NY/T 672(植物轉基因成分檢測通用要求)。 - 行業(yè)指南:AOAC官方方法(如OMA 2014.02)及美國農業(yè)部(USDA)的GMO檢測規(guī)范。 檢測過程需執(zhí)行嚴格的質控措施,包括陽性/陰性對照、內參基因檢測及重復性驗證,確保結果準確性和可追溯性。
證書編號:241520345370
證書編號:CNAS L22006
證書編號:ISO9001-2024001
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