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α-羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒符合要求檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-08-06 20:25:36 更新時(shí)間：2025-08-05 20:25:36

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

α-羥丁酸脫氫酶（α-HBDH）是乳酸脫氫酶（LDH）的一種重要同工酶，主要存在于心肌組織中，在臨床診斷中扮演著關(guān)鍵角色。當(dāng)心肌細(xì)胞發(fā)生損傷時(shí)，如心肌梗死、心肌炎等疾病，α-HBDH會(huì)迅速釋放到血液中，導(dǎo)致血清酶活性顯著升高。因此，α-HBDH活性測(cè)定成為評(píng)估心肌損傷的敏感指標(biāo)之一，尤其在早期診斷和疾病監(jiān)測(cè)中具有不可替代的價(jià)值。試劑盒形式的檢測(cè)工具廣泛應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室，確保檢測(cè)過程高效、標(biāo)準(zhǔn)化。本檢測(cè)試劑盒旨在提供一種可靠、簡(jiǎn)便的方法來定量測(cè)量α-HBDH活性，滿足醫(yī)療診斷的嚴(yán)格需求，包括高特異性、高精度和良好的重現(xiàn)性，以支持心血管疾病的及時(shí)干預(yù)和治療決策。

檢測(cè)項(xiàng)目

α-羥丁酸脫氫酶測(cè)定試劑盒的核心檢測(cè)項(xiàng)目是定量分析血清或血漿樣本中的α-HBDH酶活性。該項(xiàng)目通常包括樣本預(yù)處理、試劑溶解、酶反應(yīng)設(shè)置和活性計(jì)算等步驟。試劑盒中的主要成分包括底物（如α-酮丁酸）、輔酶（如還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，NADH）、緩沖液和穩(wěn)定劑。檢測(cè)焦點(diǎn)在于測(cè)量酶催化底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的速率，用于評(píng)估心肌損傷程度。臨床應(yīng)用包括心肌梗死的輔助診斷、治療效果監(jiān)測(cè)以及與其他心臟標(biāo)志物（如肌鈣蛋白）的聯(lián)合分析。項(xiàng)目設(shè)計(jì)需確保線性范圍寬、干擾因素少，以適應(yīng)不同樣本類型（如新鮮或凍存血清）。

檢測(cè)儀器

用于α-HBDH測(cè)定的檢測(cè)儀器主要包括自動(dòng)化生化分析儀和分光光度計(jì)。自動(dòng)化生化分析儀（如羅氏Cobas系列、貝克曼AU系列或西門子Advia系列）是主流設(shè)備，能夠?qū)崿F(xiàn)樣本自動(dòng)加樣、試劑混合、恒溫孵育和吸光度實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，大大提升檢測(cè)效率和精度。分光光度計(jì)（如Thermo Scientific的NanoDrop或PerkinElmer的Lambda系列）則適用于手動(dòng)或半自動(dòng)方法，通過測(cè)量340 nm波長(zhǎng)處NADH吸光度的變化來計(jì)算酶活性。儀器需定期校準(zhǔn)，使用標(biāo)準(zhǔn)品驗(yàn)證性能，并符合ISO 15189等實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系要求，以確保結(jié)果可靠性和重現(xiàn)性。此外，溫控孵育箱和微量移液器也是輔助工具，用于維持反應(yīng)溫度（如37°C）和精確體積控制。

檢測(cè)方法

α-HBDH檢測(cè)采用基于酶動(dòng)力學(xué)的速率法（kinetic method），這是最常用的檢測(cè)方法。該方法的核心原理是監(jiān)測(cè)α-HBDH催化α-酮丁酸還原為α-羥丁酸的反應(yīng)過程，同時(shí)NADH被氧化為NAD+，導(dǎo)致340 nm處的吸光度下降。檢測(cè)步驟包括：1. 將樣本與試劑混合，起始反應(yīng)；2. 在恒溫條件下（通常37°C），用分光光度計(jì)記錄吸光度變化（ΔA/min）；3. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線或計(jì)算公式（如使用米氏方程）計(jì)算酶活性值（單位：U/L）。方法優(yōu)勢(shì)在于高靈敏度和低干擾，但需嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)間（如2-5分鐘）和pH值（緩沖液pH約7.4）。其他備選方法包括固定時(shí)間點(diǎn)比色法，但動(dòng)力學(xué)法更精準(zhǔn)，且符合國(guó)際臨床化學(xué)聯(lián)合會(huì)（IFCC）推薦標(biāo)準(zhǔn)。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

α-HBDH檢測(cè)試劑盒必須符合嚴(yán)格的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)規(guī)范，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性、可比性和臨床可用性。主要檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)包括：1. 性能標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)IFCC指南，試劑盒需在精密度（批內(nèi)CV≤5%，批間CV≤10%）、準(zhǔn)確度（與參考方法偏差小于±10%）、線性范圍（通常40-500 U/L）和靈敏度（檢測(cè)下限≤20 U/L）方面達(dá)標(biāo)。2. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)：使用可溯源的校準(zhǔn)品（如NIST認(rèn)證），并定期驗(yàn)證。3. 參考區(qū)間：健康成年人血清α-HBDH活性正常參考范圍為72-182 U/L，需依據(jù)人群數(shù)據(jù)調(diào)整。4. 質(zhì)量控制：實(shí)施室內(nèi)質(zhì)控（如使用商業(yè)質(zhì)控血清）和室間質(zhì)評(píng)（如CAP或EQAS項(xiàng)目），以確保試劑盒在臨床環(huán)境中穩(wěn)定可靠。此外，需滿足ISO 13485醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系和CE/FDA認(rèn)證要求，涵蓋生產(chǎn)、包裝和儲(chǔ)存規(guī)范。