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分離定量檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-08-23 10:23:40 更新時(shí)間：2025-08-22 10:23:41

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

分離定量檢測(cè)：關(guān)鍵技術(shù)與應(yīng)用解析

分離定量檢測(cè)是現(xiàn)代分析化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境科學(xué)及工業(yè)質(zhì)量控制領(lǐng)域不可或缺的核心技術(shù)之一。其核心目標(biāo)是在復(fù)雜體系中將待測(cè)組分有效分離，并實(shí)現(xiàn)其濃度的精確量化。隨著科研與工業(yè)需求的不斷提升，分離定量檢測(cè)不僅要求高靈敏度、高選擇性，還必須具備良好的重復(fù)性與自動(dòng)化水平。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于藥物代謝研究、食品安全檢測(cè)、環(huán)境污染物監(jiān)測(cè)、臨床診斷以及新材料開發(fā)等多個(gè)領(lǐng)域。例如，在藥物研發(fā)中，通過(guò)高效液相色譜（HPLC）結(jié)合質(zhì)譜（MS）技術(shù)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)微量活性成分及其代謝產(chǎn)物的分離與定量；在食品安全方面，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）能精準(zhǔn)檢測(cè)食品中殘留的農(nóng)藥、添加劑等有害物質(zhì)。與此同時(shí)，隨著檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的日益嚴(yán)格和檢測(cè)儀器的不斷智能化，分離定量檢測(cè)正朝著高通量、微型化、實(shí)時(shí)化方向快速發(fā)展。因此，深入理解檢測(cè)項(xiàng)目、選用合適的檢測(cè)儀器、掌握科學(xué)的檢測(cè)方法以及遵循權(quán)威的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，成為確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵。

常見(jiàn)檢測(cè)項(xiàng)目

分離定量檢測(cè)的項(xiàng)目涵蓋多個(gè)學(xué)科領(lǐng)域，主要包括：有機(jī)小分子（如藥物、激素、毒素）、揮發(fā)性有機(jī)物（VOCs）、重金屬離子、多環(huán)芳烴（PAHs）、農(nóng)藥殘留、食品添加劑（如防腐劑、甜味劑）、生物大分子（如蛋白質(zhì)、核酸）、代謝物（如氨基酸、糖類）以及納米材料的含量分析。這些項(xiàng)目往往存在于復(fù)雜的基質(zhì)中，如血清、尿液、土壤、水樣、食品樣品等，因此分離與定量的難度較高，需要高度專業(yè)的檢測(cè)手段。

主流檢測(cè)儀器

實(shí)現(xiàn)分離定量檢測(cè)離不開先進(jìn)的分析儀器。目前，應(yīng)用最廣泛的檢測(cè)儀器包括：

高效液相色譜儀（HPLC）：適用于熱不穩(wěn)定、極性強(qiáng)或大分子化合物的分離，常與紫外檢測(cè)器（UV）、熒光檢測(cè)器（FLD）或質(zhì)譜檢測(cè)器（MS）聯(lián)用。
氣相色譜儀（GC）：特別適合揮發(fā)性、半揮發(fā)性有機(jī)化合物的分離，常與質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用，廣泛用于環(huán)境和食品安全檢測(cè)。
離子色譜儀（IC）：用于陰離子和陽(yáng)離子的分離與定量，如氯離子、硝酸根、鈉離子等，常用于水質(zhì)分析。
毛細(xì)管電泳儀（CE）：基于電場(chǎng)驅(qū)動(dòng)下不同組分遷移速率的差異實(shí)現(xiàn)分離，適用于蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的分析。
質(zhì)譜儀（MS）：作為高靈敏度檢測(cè)器，常與色譜技術(shù)聯(lián)用（如LC-MS、GC-MS），實(shí)現(xiàn)化合物的精準(zhǔn)鑒定與定量。

典型檢測(cè)方法

分離定量檢測(cè)方法的選擇需根據(jù)樣品特性、目標(biāo)物性質(zhì)及檢測(cè)精度要求而定。常見(jiàn)方法包括：

外標(biāo)法：通過(guò)配制一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，建立濃度與響應(yīng)值之間的線性關(guān)系，用于未知樣品的定量分析，操作簡(jiǎn)單，適用于常規(guī)檢測(cè)。
內(nèi)標(biāo)法：在樣品中加入已知量的內(nèi)標(biāo)物，通過(guò)比較目標(biāo)物與內(nèi)標(biāo)物的響應(yīng)比值來(lái)消除加樣誤差與儀器波動(dòng)，顯著提高定量準(zhǔn)確性，廣泛應(yīng)用于復(fù)雜基質(zhì)樣品。
標(biāo)準(zhǔn)加入法：在樣品中加入不同量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，通過(guò)外推法計(jì)算原始濃度，特別適用于基質(zhì)效應(yīng)嚴(yán)重的樣品。
多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）技術(shù)：在LC-MS/MS中，用于特定化合物的高選擇性、高靈敏度定量，常用于藥物代謝和痕量分析。

主要檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

為確保檢測(cè)結(jié)果的可比性與權(quán)威性，全球多個(gè)機(jī)構(gòu)制定并發(fā)布了相關(guān)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，主要包括：

GB/T（中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)）：如GB 5009系列涉及食品中重金屬、農(nóng)藥殘留等檢測(cè)方法；GB/T 21317-2007用于高效液相色譜法測(cè)定藥物殘留。
ISO（國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織）：如ISO 17025《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則》，是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系的國(guó)際通用標(biāo)準(zhǔn)。
AOAC International：美國(guó)官方分析化學(xué)家協(xié)會(huì)制定的食品、飼料和環(huán)境樣品檢測(cè)方法，被廣泛采納。
USP（美國(guó)藥典）：規(guī)定藥品和輔料的檢測(cè)方法與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括分離定量要求。
EP（歐洲藥典）與JP（日本藥典）：分別適用于歐洲和日本市場(chǎng)的藥物檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。

遵循這些標(biāo)準(zhǔn)不僅保證了檢測(cè)結(jié)果的合規(guī)性，也為跨國(guó)數(shù)據(jù)互認(rèn)和市場(chǎng)監(jiān)管提供了技術(shù)保障。