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有機(jī)及無機(jī)成份定性定量-分光光度法檢測

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發(fā)布時間：2025-08-27 17:15:45 更新時間：2025-08-26 17:15:47

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

有機(jī)及無機(jī)成份定性定量-分光光度法檢測

分光光度法是一種基于物質(zhì)對特定波長光的吸收特性來進(jìn)行定性分析和定量測定的常用分析方法。該方法利用分光光度計測量樣品溶液對不同波長光的吸收程度，從而推斷樣品中有機(jī)或無機(jī)成分的存在及其濃度。分光光度法因其操作簡便、靈敏度高、選擇性好、成本較低等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測、食品分析、醫(yī)藥研發(fā)、化工生產(chǎn)等領(lǐng)域。在有機(jī)成分檢測中，常用于測定如蛋白質(zhì)、核酸、維生素、農(nóng)藥殘留等；在無機(jī)成分檢測中，常用于金屬離子（如鐵、銅、鋅）、陰離子（如硝酸鹽、磷酸鹽）等的分析。該方法的基本原理是比爾-朗伯定律，即吸光度與溶液濃度和光程長度成正比，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法或標(biāo)準(zhǔn)加入法實現(xiàn)定量分析。在實際應(yīng)用中，需注意樣品前處理、干擾消除和儀器校準(zhǔn)等環(huán)節(jié)，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

檢測項目

分光光度法可用于多種有機(jī)和無機(jī)成分的定性及定量檢測。常見檢測項目包括：有機(jī)成分如蛋白質(zhì)（通過 Bradford 或 Lowry 法）、核酸（DNA/RNA 濃度）、維生素（如維生素 C 和 B 族）、農(nóng)藥殘留（如有機(jī)磷和氨基甲酸酯類）；無機(jī)成分如金屬離子（鐵、銅、鋅、鉛等，通過絡(luò)合反應(yīng)顯色）、陰離子（硝酸鹽、亞硝酸鹽、磷酸鹽等）。此外，還可用于水質(zhì)分析中的化學(xué)需氧量（COD）和生化需氧量（BOD）測定，以及食品中的添加劑和污染物檢測。每個項目通常基于特定化學(xué)反應(yīng)生成有色化合物，其吸光度與濃度相關(guān)。

檢測儀器

分光光度法是依賴專用儀器進(jìn)行的，主要設(shè)備為分光光度計。常見的類型包括紫外-可見分光光度計（UV-Vis spectrophotometer），用于測量在紫外和可見光區(qū)域（通常190-800 nm）的吸收；以及紅外分光光度計，用于有機(jī)官能團(tuán)分析。儀器關(guān)鍵部件包括光源、單色器（用于選擇特定波長）、樣品室、檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。現(xiàn)代分光光度計 often 配備自動進(jìn)樣器、溫控單元和軟件，支持多波長掃描和定量計算。使用時需定期校準(zhǔn)儀器，例如使用空白溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行基線校正和標(biāo)準(zhǔn)曲線建立，以確保測量精度。維護(hù)方面，注意清潔比色皿、避免氣泡和雜質(zhì)干擾。

檢測方法

分光光度法的檢測方法通常包括樣品制備、反應(yīng)顯色、測量吸光度和數(shù)據(jù)分析步驟。首先，進(jìn)行樣品前處理，如稀釋、過濾或萃取，以去除干擾物并制備合適濃度的溶液。對于有機(jī)成分， often 添加顯色劑（如考馬斯亮藍(lán)用于蛋白質(zhì)）發(fā)生反應(yīng)生成有色產(chǎn)物；對于無機(jī)成分，可能使用絡(luò)合劑（如鄰菲啰啉用于鐵離子）形成有色絡(luò)合物。然后，將樣品溶液裝入比色皿，置于分光光度計中，在特定波長下測量吸光度。定量分析時，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（使用已知濃度標(biāo)準(zhǔn)品）計算未知樣品的濃度。方法需優(yōu)化參數(shù)如pH、反應(yīng)時間和溫度，以提高靈敏度和準(zhǔn)確性。常見方法有直接法、差示分光光度法和導(dǎo)數(shù)分光光度法，以處理復(fù)雜樣品矩陣。

檢測標(biāo)準(zhǔn)

分光光度法的應(yīng)用需遵循相關(guān)國家和國際標(biāo)準(zhǔn)，以確保結(jié)果的可比性和合規(guī)性。常見標(biāo)準(zhǔn)包括中國國家標(biāo)準(zhǔn)（GB）、國際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISO）和美國材料與試驗協(xié)會（ASTM）標(biāo)準(zhǔn)。例如，GB/T 5009.系列用于食品中有機(jī)成分檢測，ISO 7887 用于水質(zhì)中鉻的測定，ASTM D1688 用于銅的檢測。標(biāo)準(zhǔn)通常規(guī)定樣品處理程序、試劑純度、波長選擇、校準(zhǔn)方法和結(jié)果計算格式。實驗室應(yīng)通過質(zhì)量控制措施，如使用參考物質(zhì)、進(jìn)行空白試驗和重復(fù)測定，來驗證方法的準(zhǔn)確度和精密度。此外，儀器需定期進(jìn)行性能驗證，例如波長準(zhǔn)確性和吸光度線性檢查，以符合標(biāo)準(zhǔn)要求。