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核酸定性檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-08-31 17:32:36 更新時(shí)間：2025-08-30 17:32:36

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

核酸定性檢測(cè)的重要性

核酸定性檢測(cè)是一種基于分子生物學(xué)技術(shù)的檢測(cè)方法，主要用于檢測(cè)生物樣本中特定核酸（如DNA或RNA）序列的存在與否，從而判斷是否感染特定病原體或攜帶特定基因。這種檢測(cè)方法在醫(yī)學(xué)診斷、傳染病監(jiān)測(cè)、食品安全、法醫(yī)鑒定等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。例如，在COVID-19疫情期間，核酸定性檢測(cè)成為全球范圍內(nèi)篩查和確診SARS-CoV-2感染的關(guān)鍵手段。其核心優(yōu)勢(shì)在于高特異性、高靈敏度以及快速結(jié)果輸出，能夠早期發(fā)現(xiàn)病原體，為疾病防控提供科學(xué)依據(jù)。此外，核酸定性檢測(cè)還可用于遺傳病篩查、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)等，幫助實(shí)現(xiàn)個(gè)性化醫(yī)療和預(yù)防性干預(yù)。

檢測(cè)項(xiàng)目

核酸定性檢測(cè)的常見項(xiàng)目包括病原體核酸檢測(cè)（如病毒、細(xì)菌、真菌等）、基因突變檢測(cè)、遺傳病相關(guān)基因檢測(cè)以及轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)等。在臨床醫(yī)學(xué)中，典型的應(yīng)用包括HIV病毒核酸定性檢測(cè)、乙型肝炎病毒（HBV）DNA檢測(cè)、丙型肝炎病毒（HCV）RNA檢測(cè)、人乳頭瘤病毒（HPV）分型檢測(cè)等。在公共衛(wèi)生領(lǐng)域，核酸定性檢測(cè)用于監(jiān)測(cè)傳染病暴發(fā)，例如流感病毒、登革熱病毒或新型冠狀病毒的篩查。此外，在食品安全方面，檢測(cè)項(xiàng)目可能涉及食品中轉(zhuǎn)基因成分或病原微生物（如沙門氏菌）的核酸定性分析。這些項(xiàng)目通?；谔囟ò行蛄性O(shè)計(jì)，確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性和針對(duì)性。

檢測(cè)儀器

核酸定性檢測(cè)依賴于先進(jìn)的分子生物學(xué)儀器，以確保檢測(cè)過程的高效和精確。主要儀器包括核酸提取儀、PCR儀（聚合酶鏈反應(yīng)儀）、實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（qPCR）、等溫?cái)U(kuò)增儀（如LAMP技術(shù)）、核酸電泳儀以及測(cè)序儀（如下一代測(cè)序NGS設(shè)備）。核酸提取儀用于從樣本（如血液、唾液或組織）中純化核酸，消除干擾物質(zhì)。PCR儀和qPCR儀是核心擴(kuò)增設(shè)備，通過溫度循環(huán)擴(kuò)增靶核酸序列，并利用熒光信號(hào)進(jìn)行定性分析。等溫?cái)U(kuò)增儀則提供更快速的檢測(cè)，無需復(fù)雜溫度變化。此外，輔助儀器如離心機(jī)、超凈工作臺(tái)和生物安全柜也常用于樣本處理和避免污染。這些儀器的選擇取決于檢測(cè)項(xiàng)目的要求，例如qPCR適用于高靈敏度定量定性檢測(cè)，而NGS適用于多靶點(diǎn)或未知病原體的篩查。

檢測(cè)方法

核酸定性檢測(cè)的方法多樣，常見技術(shù)包括聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）、核酸雜交技術(shù)（如Southern blot或FISH）以及基因芯片技術(shù)。PCR方法通過引物特異性擴(kuò)增靶核酸，然后通過凝膠電泳或熒光檢測(cè)判斷結(jié)果；qPCR則結(jié)合熒光探針，實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和定性分析，提高準(zhǔn)確性和速度。LAMP是一種等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，操作簡(jiǎn)單、快速，適用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。核酸雜交技術(shù)依賴于探針與靶序列的結(jié)合，用于確認(rèn)特定序列的存在。此外，新興方法如CRISPR-based檢測(cè)（如SHERLOCK或DETECTR）也用于核酸定性，提供高特異性和便攜性。檢測(cè)流程通常包括樣本采集、核酸提取、擴(kuò)增、檢測(cè)和結(jié)果分析，每一步需嚴(yán)格控制以避免假陽性或假陰性。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

核酸定性檢測(cè)需遵循嚴(yán)格的國際和國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)，以確保結(jié)果的可靠性、可重復(fù)性和安全性。常見標(biāo)準(zhǔn)包括ISO標(biāo)準(zhǔn)（如ISO 15189 for medical laboratories）、CDC指南（如針對(duì)HIV或COVID-19的檢測(cè)協(xié)議）、WHO推薦方案以及國家藥監(jiān)局（NMPA）或FDA的審批要求。標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容涵蓋樣本處理、儀器校準(zhǔn)、試劑質(zhì)量控制、人員培訓(xùn)、數(shù)據(jù)分析和報(bào)告格式。例如，對(duì)于傳染病檢測(cè)，標(biāo)準(zhǔn)可能規(guī)定靈敏度（檢測(cè)下限）和特異性（無交叉反應(yīng)）指標(biāo)，如檢測(cè)限應(yīng)達(dá)到一定拷貝數(shù)/毫升。此外，倫理和生物安全標(biāo)準(zhǔn)（如BSL-2實(shí)驗(yàn)室要求）也至關(guān)重要，以防止污染和保障操作者安全。定期 audits 和 proficiency testing 是維護(hù)標(biāo)準(zhǔn) compliance 的關(guān)鍵部分。