豬傳染性胸膜肺炎BIOVET ELISA檢測檢測
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發(fā)布時(shí)間:2025-05-14 03:19:36 更新時(shí)間:2025-05-13 03:19:39
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作者:中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心
豬傳染性胸膜肺炎(Porcine Contagious Pleuropneumonia, PCP)是由胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)引起的一種高度接觸性呼吸道傳染病,具有傳播快、致死" />
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發(fā)布時(shí)間:2025-05-14 03:19:36 更新時(shí)間:2025-05-13 03:19:39
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作者:中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心
豬傳染性胸膜肺炎(Porcine Contagious Pleuropneumonia, PCP)是由胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)引起的一種高度接觸性呼吸道傳染病,具有傳播快、致死率高的特點(diǎn),對全球養(yǎng)豬業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失。早期診斷和精準(zhǔn)檢測是防控該病的關(guān)鍵。傳統(tǒng)的細(xì)菌分離培養(yǎng)和血清學(xué)檢測方法存在耗時(shí)長、靈敏度低等局限,而BIOVET ELISA檢測技術(shù)憑借其高通量、快速性和高特異性,已成為當(dāng)前主流的實(shí)驗(yàn)室檢測手段。本文將從檢測項(xiàng)目、檢測儀器、檢測方法及檢測標(biāo)準(zhǔn)四個(gè)方面,系統(tǒng)解析該技術(shù)的應(yīng)用原理及操作規(guī)范。
BIOVET ELISA檢測主要針對豬傳染性胸膜肺炎的以下核心指標(biāo):
1. 病原體抗原檢測:直接檢測樣本中APP的特異性抗原(如Apx毒素或外膜蛋白),用于急性感染期的快速確診。
2. 抗體檢測:通過檢測血清中的IgG或IgM抗體,評估豬群免疫狀態(tài)或感染歷史,適用于流行病學(xué)調(diào)查和免疫效果評價(jià)。
3. 分型檢測:基于不同血清型(如APP 1-19型)的抗原差異,確定流行毒株的血清型,指導(dǎo)疫苗選擇和防控策略制定。
BIOVET ELISA檢測需配備以下專業(yè)儀器設(shè)備:
1. 酶標(biāo)儀(Microplate Reader):用于讀取96孔板中樣本的吸光度值(OD值),需具備450nm和630nm雙波長檢測功能。
2. 自動(dòng)洗板機(jī)(Plate Washer):確保洗滌步驟的標(biāo)準(zhǔn)化,減少人工操作誤差。
3. 恒溫孵育箱:提供37℃恒溫環(huán)境,保障抗原-抗體反應(yīng)的穩(wěn)定性。
4. 微量移液器及多通道移液器:用于精確加樣,提高檢測重復(fù)性。
BIOVET ELISA檢測的操作流程分為四個(gè)階段:
1. 樣本采集與處理:采集豬血清或肺組織液,離心后取上清液,按試劑盒要求進(jìn)行稀釋或滅活處理。
2. 包被與封閉:將特異性抗原(或抗體)包被于酶標(biāo)板孔內(nèi),加入封閉液(如BSA)減少非特異性結(jié)合。
3. 反應(yīng)與顯色:依次加入待測樣本、酶標(biāo)二抗和底物溶液(如TMB),通過酶催化反應(yīng)生成顯色產(chǎn)物。
4. 結(jié)果判讀:終止反應(yīng)后讀取OD值,計(jì)算樣本/陰性對照比值(S/N值),根據(jù)閾值(Cut-off值)判定陽性或陰性結(jié)果。
為確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性,需嚴(yán)格遵循以下標(biāo)準(zhǔn):
1. 國際標(biāo)準(zhǔn):參照世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)《陸生動(dòng)物診斷試驗(yàn)與疫苗手冊》中APP檢測的操作規(guī)范。
2. 試劑盒說明書:按照BIOVET ELISA試劑盒規(guī)定的保存條件、反應(yīng)時(shí)間和溫度執(zhí)行操作。
3. 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控:每批次檢測需包含陽性對照、陰性對照和空白對照,CV值(變異系數(shù))應(yīng)≤15%。
4. 結(jié)果確認(rèn):陽性樣本建議通過PCR或細(xì)菌分離進(jìn)行復(fù)核,排除交叉反應(yīng)導(dǎo)致的假陽性。
通過標(biāo)準(zhǔn)化應(yīng)用BIOVET ELISA技術(shù),可實(shí)現(xiàn)對豬傳染性胸膜肺炎的精準(zhǔn)監(jiān)測,為養(yǎng)殖場的生物安全管理和疫病凈化提供科學(xué)依據(jù)。
證書編號:241520345370
證書編號:CNAS L22006
證書編號:ISO9001-2024001
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